抗體無(wú)論是保存仍是運(yùn)送都應(yīng)盡可能地防止重復(fù)凍融,收到抗體后請(qǐng)依據(jù)試驗(yàn)的需求,對(duì)抗體進(jìn)行分裝,防止同一管抗體重復(fù)凍融(重復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體空間結(jié)構(gòu)變 性,導(dǎo)致多聚體構(gòu)成,然后下降抗體的結(jié)合能力)??贵w保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和運(yùn)用作用,假如抗體保存得當(dāng),抗體活性大部分都能夠維持?jǐn)?shù)年。 請(qǐng)謹(jǐn)記,無(wú)論何時(shí)請(qǐng)按照說(shuō)明書推薦的保存條件正確處理和保存抗體。
1. 收到抗體后,請(qǐng)務(wù)必在4℃,12000rpm,離心3分鐘,(無(wú)論是液體仍是凍干粉狀態(tài)),再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存(假如抗體體積小于50ul,請(qǐng)延伸 離心時(shí)刻至5分鐘,以確保悉數(shù)抗體均離心下來(lái))??贵w一般運(yùn)用特制的貯存管,只有在12000rpm離心3分鐘,才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體悉數(shù)離心下 來(lái)(即使是在10000rpm離心也會(huì)離心不*,導(dǎo)致呈現(xiàn)抗體的量缺乏的現(xiàn)象)。
2. 關(guān)于ProSci大部分抗體,比較合適的保存方法是,分裝后保存在-20℃或許-80℃。
(1)對(duì)絕大多數(shù)抗體來(lái)說(shuō),保存在-20℃就*足夠了,沒有任何證據(jù)顯示保存在-80℃會(huì)更好。
(2)分裝能夠Most程度的下降重復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害,同時(shí)也下降了由于屢次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
(3)分裝的量以一次試驗(yàn)用完為好,少不能少于10ul每份。由于分裝體積越小,抗體的濃度越可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響。
(4)復(fù)融后的分裝抗體假如一次用不完,將剩余母液保存在4℃,防止再凍起來(lái)。
(5)抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,4℃保存盡量不要超過1天。
(6)防止將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱中,將抗體保存在冰箱里層,防止溫度變化造成重復(fù)凍融。
3. 大部分抗體收到后4℃短暫保存1~2周對(duì)抗體活性沒有影響。
4. 大部分抗體的運(yùn)送條件:一般的運(yùn)送過程需求1~2周的時(shí)刻,所以是在低溫4℃的條件下來(lái)完成的。
抗體4℃運(yùn)送主要的意圖是為了防止重復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害(假如運(yùn)用干冰運(yùn)送,那么收屆時(shí)抗體是凍起來(lái)的,為了分裝就需求凍結(jié),這就多了一次凍融的過程),所以運(yùn)送過程中防止干冰運(yùn)送。
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