血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)維持血管動(dòng)態(tài)平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統(tǒng)的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調(diào)節(jié)因子。
內(nèi)皮細(xì)胞還釋放控制細(xì)胞增殖和調(diào)節(jié)血管壁緊張度的分子。這些過(guò)程都可以用培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行體外研究，人臍靜脈和動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是這類(lèi)研究中常用的細(xì)胞類(lèi)型。
除了普通的內(nèi)皮細(xì)胞特征例如“鵝卵石狀”，VIII因子陽(yáng)性著色，能攝取乙?；兔芏戎鞍祝四氀軆?nèi)皮細(xì)CD31染色陽(yáng)性。用IL-1或TNF-α預(yù)先處理過(guò)的細(xì)胞也能選擇性地表達(dá)E-selectin和VCAM。
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)提取于人臍帶靜脈組織，原代凍存。每管含有細(xì)胞數(shù)>5×105 cells/ml，此細(xì)胞通過(guò)vWF/Factor VIII 和CD31 (P-CAM)免疫熒光染色驗(yàn)證，經(jīng)測(cè)試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。細(xì)胞可以達(dá)到15倍增。 那么我們?cè)谑盏饺四氺o脈內(nèi)皮細(xì)胞之后有哪些需要注意的呢?
1.收到細(xì)胞后，首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否全揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請(qǐng)拍照)，記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
3.由于運(yùn)輸?shù)脑?，部分?xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪(fǎng)直至問(wèn)題解決。
4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。
